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PCR反應(yīng)的特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與靈敏性，但令人頭痛的問(wèn)題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。那么你知道PCR反應(yīng)污染的處理方法有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、環(huán)境污染1.稀酸處理法：對(duì)可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡，使殘余DNA脫嘌呤。2.紫外照射（UV）法：紫外波長(zhǎng)（nm）一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是，選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時(shí)，要考慮PCR產(chǎn)物的長(zhǎng)度與產(chǎn)物序列中堿基的分布，UV照射僅對(duì)500bp以上長(zhǎng)片段有效...

離心柱上有硅膠濾膜，在高鹽低pH條件下，核酸能結(jié)合到硅膠膜上，而蛋白質(zhì)和其他代謝產(chǎn)物被洗脫；后續(xù)改變反應(yīng)條件到低鹽高pH來(lái)洗脫純化DNA。用離心柱法來(lái)提取DNA，得到的DNA質(zhì)量好，純度和濃度較高。那么離心柱法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、實(shí)驗(yàn)步驟1.平衡液預(yù)處理取一個(gè)新的吸附柱放在收集管中，懸空加入100μL的平衡液至離心柱中，12000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液，將離心柱放回收集管中，備用。2.處理材料（1）如提取材料為血液，...

你知道該如何制備蛋白質(zhì)電泳凝膠嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、制備方法1.根據(jù)垂直電泳槽說(shuō)明書(shū)安裝玻璃板，確定需配制分離膠的濃度和體積，配制所需分離膠；2.迅速將分離膠注入兩玻璃板間隙中，留出灌注積層膠所需空間（梳子的齒長(zhǎng)再加1cm，用滴管小心地在分離膠上覆蓋一層0.1%SDS（當(dāng)丙烯酰胺濃度≤8%時(shí)）或異丁醇或水（當(dāng)丙烯酰胺濃度≥10%時(shí)），覆蓋層可防止氧擴(kuò)散進(jìn)入凝膠而抑制聚合反應(yīng)。將凝膠垂直置于室溫下；3.分離膠聚合wan全后，倒出覆蓋層液體，用去離子水洗滌凝膠頂部數(shù)次以除去...

磁珠法核酸純化技術(shù)采用了納米級(jí)磁珠微珠，這種磁珠微珠的表面標(biāo)記了一種對(duì)核酸有吸附作用的特定活性官能團(tuán)，能同核酸發(fā)生吸附反應(yīng)，從而達(dá)到核酸與雜質(zhì)分離的目的，進(jìn)而獲得純化的核酸。那么磁珠法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有什么呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、步驟1、樣本處理：核酸必須從細(xì)胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來(lái)。（1）植物組織：液氮研磨或在特殊裂解液中電動(dòng)勻漿；（2）動(dòng)物組織：液氮研磨或裂解液中手動(dòng)/電動(dòng)勻漿；（3）血細(xì)胞：應(yīng)用紅細(xì)胞裂解液處理；（4）細(xì)胞：胰酶處理或蛋白酶K處理。2...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)產(chǎn)物中通常會(huì)含有過(guò)量的引物、dNTP、酶等，這些會(huì)對(duì)后續(xù)核酸序列測(cè)定、酶切、載體構(gòu)建等產(chǎn)生影響，通過(guò)PCR純化回收可獲取純的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物。那么PCR純化回收的步驟與注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、步驟1.在紫外投射儀或凝膠成像儀上，用刀片切取包含目的條帶的瓊脂糖凝膠并稱(chēng)重；2.一般以0.1g膠加入100μl溶膠液的比例（具體根據(jù)試劑盒說(shuō)明添加），按凝膠實(shí)際重量加入溶膠液，水浴鍋中55℃溶膠（期間可緩慢震動(dòng)Ep管，將膠溶解wan全）；3.回收試劑盒中會(huì)...