Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒通過利用離心柱或微珠的特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)和相應(yīng)緩沖液的針對性作用,實現(xiàn)了對質(zhì)粒DNA的高效提取。其原理主要包括裂解細胞、選擇性結(jié)合質(zhì)粒DNA、洗滌去除雜質(zhì)、解吸質(zhì)粒DNA和純化質(zhì)粒DNA這幾個步驟。通過這些步驟的組合,可以獲得高純度的質(zhì)粒DNA樣品,適用于各種分子生物學(xué)應(yīng)用,如限制酶切、PCR擴增和測序等。
Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒的使用方法及應(yīng)用:
1.培養(yǎng)細菌:將細菌菌株接種到含有相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基上,并在適當?shù)臏囟葪l件下培養(yǎng)細菌,直至達到適當?shù)募毦芏取?br />
2.收集細菌:將培養(yǎng)的細菌轉(zhuǎn)移到離心管中,并進行離心,以沉淀細菌細胞。
3.細菌溶解:將離心后的細菌細胞重懸于溶解緩沖液中,溫和地震蕩管,使細菌細胞溶解。
4.蛋白質(zhì)沉淀:加入蛋白質(zhì)沉淀試劑,混勻后離心,將上清液倒掉,留下蛋白質(zhì)沉淀。
5.提取DNA:將DNA結(jié)合柱放置于收集管中,將上述蛋白質(zhì)沉淀溶液加入DNA結(jié)合柱中,并進行離心。然后將DNA結(jié)合柱轉(zhuǎn)移到新的收集管中。
6.洗滌DNA:將洗滌緩沖液1加入DNA結(jié)合柱中,離心,將上清液倒掉,重復(fù)此步驟一次。然后加入洗滌緩沖液2,離心,并將上清液倒掉。
7.質(zhì)粒DNA重溶:將DNA結(jié)合柱轉(zhuǎn)移到含有洗滌緩沖液3的管中,并在常溫下孵育片刻,通過離心將DNA從DNA結(jié)合柱上還原到收集管中。
Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒的維護保養(yǎng)建議:
1.儲存溫度:應(yīng)儲存在溫度范圍內(nèi)。根據(jù)產(chǎn)品說明書,通常應(yīng)在-20℃保存。確保在儲存期間處于恒定的低溫環(huán)境中,避免反復(fù)凍融。
2.保持干燥:中的某些組分對潮濕敏感,因此應(yīng)避免受潮。在使用前,請確保所有試劑瓶蓋都緊閉,并將其放在干燥的地方。
3.避免污染:使用時需注意操作的嚴格無菌條件以避免污染。使用無菌技術(shù)和工具,并確保所有操作臺和工作區(qū)都經(jīng)過清潔消毒。
4.注意過期日期:檢查上的過期日期。過期的試劑可能會導(dǎo)致性能下降或失敗,因此請勿使用過期的試劑。
5.適當保存剩余試劑:當使用完所需的試劑量后,可以將剩余的試劑保存在特定的條件下供以后使用。請根據(jù)產(chǎn)品說明書上的建議保存任何剩余的試劑,并確保它們不會受到污染。
6.按照說明書操作:在使用Zymo質(zhì)粒提/大提試劑盒時,務(wù)必按照產(chǎn)品說明書上的指導(dǎo)進行操作。嚴格遵循說明書中的步驟和注意事項,以確保結(jié)果。
7.建議參照其他相關(guān)的實驗室維護保養(yǎng)指南:在使用之前,建議充分閱讀其他實驗室維護保養(yǎng)指南。