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DMEM培養(yǎng)基的制作工藝是什么?

 更新時(shí)間:2023-12-11    點(diǎn)擊量:594

DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基,用于支持多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的制作工藝是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!

1. 準(zhǔn)備所需材料:DMEM培養(yǎng)基粉末、無(wú)菌去離子水、無(wú)菌濾器、無(wú)菌容器、pH計(jì)、稱量?jī)x器、試劑瓶等。

2. 消毒操作區(qū)域:將工作臺(tái)、培養(yǎng)器具、儀器等進(jìn)行消毒處理,確保無(wú)菌條件。

3. 稱量DMEM粉末:根據(jù)所需培養(yǎng)基的濃度和容量,稱取適量的DMEM粉末。

4. 加入無(wú)菌去離子水:將DMEM粉末緩慢加入無(wú)菌容器中的無(wú)菌去離子水,同時(shí)攪拌均勻,直到wan全溶解。

5. 調(diào)整pH值:使用pH計(jì)測(cè)量培養(yǎng)基的pH值,如果不在理想范圍內(nèi)(通常為7.2-7.4),則通過(guò)添加少量無(wú)菌的NaOHHCl來(lái)調(diào)整pH值。

6. 滅菌:將調(diào)整好pH值的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌處理,確保無(wú)菌性。

7. 分裝和保存:將滅菌的DMEM培養(yǎng)基分裝到無(wú)菌試劑瓶中,封閉好,存放在4℃冰箱中保存。

注意事項(xiàng):

1. 在制備過(guò)程中,需要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免細(xì)菌和其他微生物的污染。

2. 所使用的水、容器、儀器等都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的消毒處理,以確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性。

3. 在稱取DMEM粉末時(shí),應(yīng)注意避免粉塵飛揚(yáng),以免對(duì)操作人員的健康造成危害。

4. 調(diào)整pH值時(shí),應(yīng)小心操作,避免酸堿溶液濺到皮膚或眼睛,如有意外發(fā)生,應(yīng)立即用大量清水沖洗相應(yīng)部位。

5. 制備好的DMEM培養(yǎng)基應(yīng)盡快分裝和保存,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在環(huán)境中,以免細(xì)菌和其他污染物進(jìn)入培養(yǎng)基中影響其質(zhì)量。

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