PEI聚乙烯亞胺線性轉(zhuǎn)染試劑是由乙烯亞胺組成的聚合物,在生物醫(yī)學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)染實驗中。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑由經(jīng)過修飾的線性PEI聚合物構(gòu)成,其結(jié)構(gòu)使其能夠與DNA或RNA形成復(fù)合物,并將其導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。其工作原理是通過靜電相互作用,將負(fù)電荷的DNA或RNA與正電荷的PEI形成復(fù)合物。這種復(fù)合物帶正電荷,可以與細(xì)胞負(fù)電荷的磷脂雙層相互作用,從而實現(xiàn)DNA或RNA的載體轉(zhuǎn)染。
PEI聚乙烯亞胺線性轉(zhuǎn)染試劑具有許多優(yōu)勢:
1.具有較高的轉(zhuǎn)染效率,能夠在短時間內(nèi)將DNA或RNA導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)。
2.在體外和體內(nèi)都能夠有效地轉(zhuǎn)染多種不同類型的細(xì)胞。
3.具有較低的細(xì)胞毒性,不會對細(xì)胞造成明顯的傷害。
PEI聚乙烯亞胺線性轉(zhuǎn)染試劑的使用步驟:
1.根據(jù)實驗需要,培養(yǎng)并準(zhǔn)備需要轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。
2.將所需DNA溶解至適當(dāng)濃度,并與PEI按照適當(dāng)比例混合。注意避免DNA/PEI混合物與金屬離子接觸,以防止PEI沉淀。
3.將DNA/PEI混合物加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,充分混合。
4.將DNA/PEI混合物加入已培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使混合物均勻覆蓋細(xì)胞。
5.將細(xì)胞培養(yǎng)皿放回恒溫培養(yǎng)箱中,孵育適當(dāng)時間使細(xì)胞攝取DNA。
PEI聚乙烯亞胺線性轉(zhuǎn)染試劑的維護(hù)保養(yǎng)方法:
1.PEI線性轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)存放在干燥、避光的環(huán)境中,避免與水分接觸,冷藏保存。
2.注意避免PEI與金屬離子的接觸,以防止PEI沉淀,影響轉(zhuǎn)染效果。
3.PEI轉(zhuǎn)染試劑使用后應(yīng)盡快密封保存,避免受到空氣中的濕氣和雜質(zhì)污染。
4.在轉(zhuǎn)染操作中,應(yīng)盡量避免PEI與生物材料接觸過久,以減少細(xì)胞毒性。
5.轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞應(yīng)及時進(jìn)行后續(xù)的實驗操作,避免長時間存放在試劑中。